Esperimenti sui Cani

Difetto Critico. Esperimento1 . Cani Beagle maschi (Greenhill, Montichiari, Italy) sono stati preparati chirurgicamente creando un difetto critico di un segmento di  1.5-cm usando una sega oscillatoria secondo pratiche chirurgiche veterinarie accetate. Il radio e la rimanente membrana interossea sono state lasciate intatte , e i tessuti molli sono stati chiusi in punta. Gli animali sono stati divisi in tre gruppi sperimentali (n = 8 per gruppo)e trattati con tre  (Groppo A), sette (Gruppo B), o 14 (Gruppo C) iniezioni giornaliere di una soluzione acquosa di CP-533,536 [100 mg/ml in PBS calcio privo di magnesio  dopo l'intervento e l'impianto di Helistat (2.5 × 5 cm) spugne di collagene pretagliate nell'area difettata , Colla-Tec, Plainsboro, NJ]. Le radiografie delle zampe anteriori immediatamente ottenute dopo l’intervento e dopo due settimane fino al termine dello studio (settimana 10).

Esperimento 2. In un altro set di esperimenti su difetti critici dell’ulna, cani beagle maschi (n = 28), preparati chirurgicamente come sopra, sono stati divisi in quattro gruppi e trattati con 1.0 ml of poly(D,L-lactide-co-glycolide) (PLGH) matrix (Atrix Laboratories) ds dolo (Gruppo A), 50 mg di CP-533,536 dissolto in 1.0 ml di matrix (Gruppo B), 10 mg of CP-533,536 dissolto in 1.0 ml di matrix (Groppo C), o 10 mg di CP-533,536 dissolto in 0.2 ml di matrix (Groppo D). In questi esperimenti,nessuna spugna pretagliata di collagene  experiments, sono state usate nell’area difetatta. Il composto è stato somministrato in singole dosi nell’intervento. Il sangue(1.0 ml) è stato raccolto dagli animali ogni 30 min, 2 h, 4 h, 24 h, 72 h, e  7 giorni dopo l’intervento.Gli animali sono stati monitorati nel post operatorio per gli effetti collaterali ,e le radiografie degli arti anteriori sono state ottenute immediatamente dopo l’intervento ed ogni settimana fino al termine dello studio  (settimana 24).

Osteotomia della Tibia. Per il modello dell’osteotomia della tibia,cani beagle maschi (n = 14) sono stati preparati mediante un’osteotomia chirurgica sulla porzione distale della tibia del cane usando una sega Gigli secondo pratiche veterinarie chirurgiche accertate. I segmenti di osso prossimali e distali sono stati stabilizzati usando una placca  AO. La rimanente membrana interossea è stata lasciata intatta. Il sito difettato è stato irrigato con soluzione salina per rimuovere detriti di ossa e riempito con PLGH matrice da sola o  matrice contenente CP-533,536 nella maniera seguente: Gruppo A, i cani sono stati lasciati senza trattamento (n = 3); Gruppo B, i cani sono stati trattati con 0.5 ml di sola matrice (n = 3); Gruppo C, i cani sono stati trattati con 5 mg di CP-533,536 disciolti in  0.5 ml di matrice (n = 4); e Gruppo D, i cani sono stati trattati con 25 mg of CP-533,536 disciolti in 0.5 ml di matrice (n = 4). Il sangue  (1.0 ml) è stato raccolto dagli animali ogni  30 min, 2 h, 4 h, e 24 h dopo l’intervento. Le radiografie delle zampe anteriori sono state ottenute immediatamente dopo l’intervento e ogni settimana fino al termine dello studio (settimana 8).

Radiografie. Le radiografie sono state interpretate da un radiologo sperimentatore tenuto all’oscuro del protocollo di trattamento e dell’intervallo postoperatorio . Sono state classificate su una scala da 0–6come descritto da Cook et al. (ref. 24; see Table 3).

Istologia. In conclusione,nel modello di difetto dell’ulna o osteotomia della tibia, le ossa contenenti il sito difettato sono state dissezionate e i muscoli rimossi . Il sito difettato dell’osso con l’osso adiacente è stato tagliato con una sega , fissate in una soluzione neutra per il  10% trattata con formalina per sette giorni ,e poi incorportato in metacrilato metilico . Sezioni seriali sono state tagliate attraverso ogni area difetatta e tinte con toluidina blue and roso base 2 verde  (23).

Analisi di CP-533,536 nel Plasma. [....]

Si prosegue parlando di analisi statistiche…